FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
brevedad posible después de 2 horas de tomadas. Coloque una gota de sangre en el centro de
una lamina limpia de microscopio. Con la esquina de una segunda lamina riegue la gota hasta que
adquiera el tamaño de una moneda de veinte centavos. El espesor debe ser tal que permita ver
apenas la impresión del periódico a través de la lámina.
Los frotis finos.- Para preparar frotis delgados se coloca una pequeña gota de sangre cerca del
extremo de un portaobjetos limpio y libre de grasa. Se sostiene otro portaobjetos, que sirve de
dispersor, con una inclinación de 30 grados del lado en el que se encuentra la muestra y se hace
que la gota se disperse por el borde. Después, de manera rápida se corre el portaobjetos
dispersor hacia delante para que la sangre se extienda y forme una lámina delgada. La cantidad
de sangre debe ser pequeña para que se extienda toda antes que el portaobjetos dispersor
alcance el extremo del otro. Se deja secar por espacio de 2 horas, resguardadas .
Estos preparados deben ser coloreados a la mayor brevedad posible después de 2 horas de
tomadas. Los extendidos pueden ser fijados después de secos en alcohol absoluto o metanol
durante 1 min. Para evitar la deshemoglobinización. Las gotas gruesas no necesitan fijación pues
la deshemoglobinización favorece para observar los eritrocitos a través de varias capar. Los
métodos más importantes son: Coloración de Giemsa. Y Coloración de Wrigth.
Coloración de Giemsa.-
Precoloración. Sumergir durante 1 segundo en azul de metileno fosfatado. Dejar
escurrir sobre una toalla de papel. Después de esto se puede colorear
inmediatamente o dejar secar en posición vertical. Las placas así tratadas se
pueden guardar varios días.
Coloración. Sumergir el porta-objetos en el frasco de solución acuosa de Giemsa
recién preparada. Esta solución se prepara agregándole 2 gotas de solución
alcohólica de Giemsa por cada ml de agua amortiguadora. Dejar actuar el colorante
de 6 a 10 minutos, tiempo que puede variar de acuerdo al lote de colorante usado.
Dejar secar y observar al microscopio
Los frotis teñidos y sin teñir deben resguardarse de insectos y luz, en cajas de almacenamiento de
portaobjetos. Para todos los procedimientos de tinción de sangre y heces, siempre deben
utilizarse muestras de control positivas y negativas
Cuando las películas estén secas, fije y coloree el frotis fino de la manera antes mencionada, pero
cuide que el pH del colorante este ligeramente alcalino, se recomienda (pH 7.2). Un colorante
ácido puede que no muestre los parásitos. La gota gruesa se colorea mejor usando colorante de
Giemsa diluido (1/20).. No fije la muestra antes de colorearse. Coloree por unos 30 minutos, lávese
suavemente y deje que se seque. Si lo tiene, utilice un control positivo.
Bajo el microscopio examine la gota gruesa primero. Use el lente de inmersión en aceite o el lente
de alto aumento para determinar si los parásitos están presentes. Tome nota del numero de
plaquetas y de leucocitos en el paciente. La malaria usualmente se asocia a un numero de
leucocitos normales o reducidos. Leucocitosis solo ocurre en casos terminales. El números de
plaquetas se reduce en forma moderada o severa en aproximadamente un 80% de los pacientes
con malaria. Los parásitos pueden aparecer distorsionados si el paciente ha sido tratado o ha
recibido profilaxis inadecuada. Las infecciones mixtas no son infrecuentes.
Examen parasitológico indirecto.-
Recientemente han salido al mercado una serie de nuevas técnicas rápidas tipo "dipstick" para el
diagnóstico de malaria. Estos equipos incluyen ICT-Malaria, Pf, OptiMAL y Determine. Estas
pruebas se basan en el principio de la detección de la proteina rica en histidina-2 (HRP-2) o la
detección de la enzima dehidrogenasa de lactato específica para parásito presente en infecciones
por P. falcíparum. Existe ya un número de informes que indican especificidades cercanas al 100%.
UNIVERSIDAD DE AQUINO BOLIVIA
62
Page 1 |
Page 2 |
Page 3 |
Page 4 |
Page 5 |
Page 6 |
Page 7 |
Page 8 |
Page 9 |
Page 10 |
Page 11 |
Page 12 |
Page 13 |
Page 14 |
Page 15 |
Page 16 |
Page 17 |
Page 18 |
Page 19 |
Page 20 |
Page 21 |
Page 22 |
Page 23 |
Page 24 |
Page 25 |
Page 26 |
Page 27 |
Page 28 |
Page 29 |
Page 30 |
Page 31 |
Page 32 |
Page 33 |
Page 34 |
Page 35 |
Page 36 |
Page 37 |
Page 38 |
Page 39 |
Page 40 |
Page 41 |
Page 42 |
Page 43 |
Page 44 |
Page 45 |
Page 46 |
Page 47 |
Page 48 |
Page 49 |
Page 50 |
Page 51 |
Page 52 |
Page 53 |
Page 54 |
Page 55 |
Page 56 |
Page 57 |
Page 58 |
Page 59 |
Page 60 |
Page 61 |
Page 62 |
Page 63 |
Page 64 |
Page 65 |
Page 66