FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE MEDICINA
El DHL colesterol bajo, esta asociado con un alto riesgo de enfermedades
cardiacas. Por este motivo la determinación de HDL colesterol es una
herramienta util en la identificación de individuos de alto riesgo.

Fundamento del Método
Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) se separan precipitando
selectivamente las lipoproteínas de baja y muy densidad (LDL y VLDL)
mediante el agregado de sulfato dextran de PM 50.000 en presencia de iones
Mg++.
En el sobrenadante separado por centrifugación, quedan las HDL y se realiza la
determinación del colesterol ligado a las mismas, empleando el sistema
enzimático Colesterol oxidasa / Peroxidasa con colimetria según Trinder (fenol/4-
Aminofenazona).


II.- PRÁCTICA
OBJETIVOS:
Determinar el colelesterol sanguíneo bioquímicamente

MATERIAL
• Espectrofotómetro • Tubos de ensayo
• Micro pipetas y pipetas • Vasos precipitados
para medir los • Jeringas, Guante,
volúmenes indicados. Torundas.
• Baño María
Reactivos
• Suero

Métodos y procedimientos
1. Poner en un tubo de ensayo 0,5 ml (500ul) de muestra,
2. agregar 50 ul de reactivo Precipitante. Homogeneizar agitando (sin
verter) durante 20 segundos y dejar 30 minutos en refrigerador o
15 minutos en baño de agua a 10 oC no colocar en congelador.
3. Centrifugar 15 mit. A 3000 r.p.m. Usar el sobrenadante liquido
como muestra y repartir en tre tubos de ensayo marcados de la
siguiente manera.
B S D
Sobrenadante - - 100 ul
Standard - 20 ul -
Reactivo de
Trabajo 2 ml 2 ml 2ml
Mezclar e incubar 15 minutos a 37 oC retirar del baño y enfriar. Leer a 505 nm en
espectrofotomeyro o en colorimetro con filtro verde ( 490 – 530 nm), llevando a cero
con el blanco.

Valores de Referencia
Los valores normales esperados para HDL colesterol son los siguientes:
Hombres: 0,30 – 0,70 g/l
Mujeres: 0,30 – 0,85 g/l



UNIVERSIDAD DE AQUINO BOLIVIA
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